分液漏斗的頸部有一個活塞，這是它區別于普通漏斗及長頸漏斗的重要原因，因為普通漏斗和長頸漏斗的頸部沒有活塞，它不能靈活控制液體。分液漏斗在使用前要將漏斗頸上的旋塞芯取出，涂上凡士林，插入塞槽內轉動使油膜均勻透明，且轉動自如。然后關閉旋塞，往漏斗內注水，檢查旋塞處是否漏水，不漏水的分液漏斗方可使用。
漏斗內加入的液體量不能超過容積的3/4。而且不宜裝堿性液體。為防止雜質落入漏斗內，應蓋上漏斗口上的塞子。當分液漏斗中的液體向下流時，活塞可控制液體的流量，若要終止反應，就要將活塞緊緊關閉，因此，可立即停止滴加液體。放液時，磨口塞上的凹槽與漏斗口頸上的小孔要對準，這時漏斗內外的空氣相通，壓強相等，漏斗里的液體才能順利流出。分液時根據“下流上倒”的原理，打開活塞讓下層液體全部流出，關閉活塞。上層從上口倒出。分液漏斗不能加熱。
漏斗用后要洗滌干凈。長時間不用的分液漏斗要把旋塞處擦拭干凈，塞芯與塞槽之間放一紙條，以防磨砂處粘連。
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